黑龙江重组胰酶常见问题

细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。胰蛋白酶是一种异源蛋白酶，与培养皿结合可以降解细胞膜上的蛋白质。黑龙江重组胰酶常见问题

    胰蛋白酶用法用量1.每次～5mg，用蒸馏水5～10ml溶解。2.一般应用：1次5000单位，每日1次肌注，用量酌情而定。为防止疼痛，可加适量普鲁卡因。局部用*视情而定，可配成溶液制剂（～，微碱性时活性**强）、喷雾剂、粉剂、油膏等，用作体腔内注射、患部注射、喷雾、湿敷、涂搽等。3.治蛇毒：取注射用结晶胰蛋白酶2000单位1～3支，加～（或注射用水）4～20ml稀释，以牙痕为中心，在伤口周围作浸润注射，或在肿胀部位上方作环状封闭1～2次。如病情需要可重复使用。若伤肢肿胀明显，可于注射本品30分钟后，切开伤口排毒减压（严重出血者例外），也可在肿胀部位针刺排毒。如伤口已坏死、溃烂，可用其***胰蛋白酶注意事项1.不可作静注。用前需作划痕试验，应注意可能产生过敏反应。2.吸取注射液后应另换针头，以免注射时疼痛。3.外用时，可采用注射用制剂以缓冲液溶解，但必须在3小时内用毕。胰蛋白酶不良反应：1．注射局部疼痛、硬结。2．本品可引起组胺释放，产生全身反应，有寒战、发热、***、头晕、胸痛、***、皮疹、血管神经性水肿、呼吸困难、眼压升高、白细胞减少等。症状轻时不影响继续***，给予抗组胺*和对症*物即可控制，严重时应即停*。3．本品偶可致过敏性休克。陕西EDTA胰酶大概价格多少0.25%胰酶消化液（含有EDTA，含酚红）pH值为7.2-7.8。

胰蛋白酶广泛应用于食品加工、制药、生化检测和制革等多种行业。在制药工业中，胰蛋白酶可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸，以达到***的目的。胰蛋白酶生物药用于***呼吸道疾病，可以溶解黏痰和脓性痰，还可以***毒蛇咬伤等。由于血清中含有非特异性抑肽酶，故胰蛋白酶不会消化正常组织，而能分解脓性痰等黏性分泌物，促进***、化疗药物向病灶渗透。在食品工业中，胰蛋白酶主要用于水解价值较高的动植物性蛋白等，以牛乳为例，利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原，能生产低敏配方奶粉。在制革工业中，胰蛋白酶用于皮革脱灰软化，也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的胶原蛋白。[1]

胰酶分装冻存时要注意什么？胰酶分装时尽量分装成多瓶，并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀，多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并增大污染的可能性。5、怎么才能判断胰酶消化完全？注意：不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才表示消化好了。一般肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙状移动就可以了，就应该停止消化。6、胰酶适用于哪些细胞消化？它的消化效果与哪些有关呢？胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞，如胚胎、上皮、肝、肾等组织，但对纤维性组织和较硬的*组织效果较差。胰酶的消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。含EDTA的胰酶消化活力会比不含EDTA的强。

常用的消化酶有:胰酶：用得**多的是胰酶。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据干细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的干细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于干细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-20度。胶原酶：胶原酶是比较少用的，一般是用原代培养时，从组织消化下干细胞。这种方法作用温和，对干细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。胰酶的质量是影响干细胞的消化的关键因素之一，如果配的比较标准，消化的时候就容易消化，反之就不易消化。还要在你看到消化过头的情况下，如果干细胞下来的比较多了，这时可以连同cmf或pbs加上营养液一起传。营养液中有血清，胰酶遇到血清就会自动终止消化，但这样操作对干细胞是有一定的影响的。对于容易消化的干细胞，加入pbs缓冲液洗去血清或加入胰酶，先中和血清的作用（30s），弃之，再加入适量胰酶作用10s-40s（根据细胞消化的难易程度），弃之，这样依赖残余的胰酶就可将干细胞消化单细胞。消化使用的胰酶是含EDTA还是不含的？贵州胰酶联系方式

胰酶细胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA。黑龙江重组胰酶常见问题

    (含)英文名:(含)储存条件:-20℃产品简介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其**适温度约为37℃。胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()由、除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下1min左右就可以消化大多数贴壁细胞。使用说明(*供参考):1.贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,去除残余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液(),略盖过细胞即可,室温放置。(不同的细胞消化时间有所不同)③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落。 黑龙江重组胰酶常见问题