青海国产胰酶采购
胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。胰酶配制方法:1、培养液配制,方便好用,对细胞影响小,并且培养液的ph值正好适合胰蛋白酶的溶解2、生理盐水配制,要先调ph值(①胰酶(1:250)②③④⑤⑥⑦Water1000mL磁力搅拌2-3小时,调,过滤除菌。)3、pbs(:称取胰酶粉末,先用少许灭菌过的PBS调成糊状,然后补足到100ml。置室温搅拌4小时或冰箱内过夜,过滤灭菌,分装,4℃保存备用。);或是hanks或是D-hanks液配制(1.称取胰蛋白酶粉末置烧杯中,先用少许D-Hanks平衡盐溶液()调成糊状,然后再补足D-Hanks平衡盐溶液,搅拌混匀,置室温4小时或冰箱过夜,并不断搅拌振荡;2.次日,先用滤纸粗滤,再进行过滤除菌,分装入瓶中,低温冰箱保存备用,常用浓度为。胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可调用碳酸氢钠溶液调pH至。)一般,至于作用效果,需要消化一次细胞感觉一下,因为不同厂家的酶不一样,有的作用温和,有的作用剧烈。4、是否需要四度放置过夜,取决于你的胰酶的纯度。过去的胰酶纯度不高,所以难以溶解,需要四度过夜.而现在的胰酶纯度都很高。 通常室温消化3-5分钟就可以消化下大多数贴壁细胞。青海国产胰酶采购
(含)英文名:(含)储存条件:-20℃产品简介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其**适温度约为37℃。胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()由、除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下1min左右就可以消化大多数贴壁细胞。使用说明(*供参考):1.贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,去除残余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液(),略盖过细胞即可,室温放置。(不同的细胞消化时间有所不同)③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落。 山东重组胰酶产品介绍胰蛋白酶溶液用于组织和单层细胞的解离。
6.磷酸酶EDTA相对不溶。可以用磁力搅拌器搅拌,或将其置于4度的冰箱中,溶解后过滤并**。7.可配备2-3倍血浆酶,节省时间和过滤器。使用时,请对PBS消毒。8.将储存溶液储存在-20°C的冰箱中,然后将溶液储存在4°C。使用时,请勿将其放在27°C的水浴中,因为这会使自由基酶迅速无法使用。使用前放置一次。是的,因为添加的数量很少,因此通常不会冻结细胞。9.在消化过程中,向培养瓶中加入适量的胰酶。个人经验,一般在10cm培养皿中加。加入后,立即摇动培养皿盖住胰酶。一旦充满,用负压吸引多余的胰酶排出,将其加入37度培养箱中进行消化。10.请注意,过量的胰酶对细胞有害,而过量的EDTA也会影响粘附,因此无需将细胞浸入血浆酶中进行消化。11.磷酸酶37具有**佳的消化作用,并具有在37度以下消化的能力。在消化过程中,甚至不需要将一些易于消化的细胞放入培养箱中。请注意,它不能消化太长时间。四、实验所需试剂清单:序列产品名货号CAS备注11000ul蓝吸头FT-10002氢氧化钠JT86501310-73-23PBSHC14884EDTABSH-59-55螯合树脂chelex100SS6072以上为EDTA-胰蛋白酶的配制,实验请选用高质量试剂。
品名:0.25%胰蛋白酶溶液,1X分类:细胞消化试剂规格:100ML用途:消化试剂,如胰蛋白酶,被用于将粘附细胞从其附着的表面或底物上分离和降解,以及将组织进行游离,以开展原代细胞培养。产品包括2种常用浓度的γ照射猪胰蛋白酶(1:250)以及一种新型非哺乳动物猪胰蛋白酶替代品,称为ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一种蛋白水解酶和胶原水解酶的混合超滤溶液,可以快速消化,同时不损伤细胞。其非哺乳动物配方使它适用于无血清应用,不需要失效或对酶抑制剂。此试剂可使细胞被快速分离,形成单细胞悬浮物,保持高细胞活力,并使传代时的变异减至**小。胰酶细胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA。
但分子构型有很大区别。沉降系数S20W为,pI=,热稳定性较牛胰蛋白酶稳定,Ca2+对酶的保护作用不及牛羊的明显,无螯合Ca2+的中心部位。有6对二硫键,断裂1~2个键,均不至于破坏酶分子的完整结构而保护了酶的活性。酶的活力分别相当于牛的72%及羊的61%。羊胰蛋白酶与牛、猪的相似,但其活力略高于牛和猪的。胰蛋白酶专一作用有碱性氨基酸精氨酸及赖氨酸羧基所组成的肽键。酶本身很容易自溶,由原先的β-胰蛋白酶酶转化为α-胰蛋白酶,再进一步降解为拟胰蛋白酶,乃至碎片,活力也逐步下降而丧失。除存在于脊椎动物外,还存在于蚕、海盘车、蝲姑、放线菌等范围***的生物体中。另外与高等动物的血液凝固和症等有关的凝血酶、纤溶酶、舒血管素等蛋白酶在化学结构和特异性等方面与胰蛋白酶具有密切的关系,可以认为这些酶是从共同的祖先酶在进化过程中分化而来的。胰糜蛋白酶与弹性蛋白酶在结构和催化机制方面也具有密切关系,但其特异性则完全不同。胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶。***品标准规定按干燥品计算,每1mg的效价不得少于2500单位。由牛、羊、猪胰脏提取而得的一种肽链内切酶。胰蛋白酶可以用于原代细胞的传代过程中分散组织。贵州EDTA胰酶
淡黄色的胰酶溶液能放心使用吗?青海国产胰酶采购
在253nm的波长处测定吸光度,必要时可用上述底物原液或磷酸盐缓冲液调节,使吸光度在~,作为底物溶液。制成后应在2小时内使用。供试品溶液的制备精密称取本品适量,加~60胰蛋白酶单位的溶液。测定法取底物溶液,加μl,混匀,作为空白。另取供试品溶液200μl,加底物溶液(恒温于℃±℃),立即计时,混匀,使比色池内的温度保持在25℃±℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版*典二部附录ⅣA),在253nm的波长处,每隔30秒钟读取吸光度,共5分钟。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标,作图;每30秒钟吸光度的改变应恒定在~,呈线性关系的时间不得少于3分钟。若不符合上述要求,应调整供试品溶液的浓度,再作测定。在上述吸光度对时间的关系图中,取成直线部分的吸光度,按下式计算:式中P为每1mg供试品中含胰蛋白酶的量,单位;A1为直线上终止的吸光度;A2为直线上开始的吸光度;T为A1至A2读数的时间,分;W为测定液中含供试品的量,mg;,吸光度每分钟改变,即相当于1个胰蛋白酶单位。胰蛋白酶制剂注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的医学检查胰蛋白酶检查名称胰蛋白酶胰蛋白酶分类血液生化检查>酶类测定胰蛋白酶胰蛋白酶的测定原理同酶速率法测定。青海国产胰酶采购
上一篇: 新疆国产血清产品介绍
下一篇: 广西HBSS平衡盐溶液生产企业