F12培养基产品介绍

    如何正确地使用培养基及**大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长，对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境，一般指完全培养液，添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的，因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养，如MEM培养基，较为常用的量为5％～10％的比例，而特殊的低血清培养基血清量可降至3％左右，细胞的形态和功能不受影响。细胞培养基&乳欧液模式化学合成培养基现虽已大规模使用，但在某些培养领域水解乳蛋白仍在使用，以补充培养液中缺乏的氨基酸、小肽物质。较为常用的方式是用汉氏（Hanks’BSS）或欧式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般为5‰浓度），即成乳汉（欧）液，再与化学合成培养基（一般为MEM）按比例混合使用（如1：1）。细胞培养基&各类添加剂（生长因子等）模式成分复杂的培养基还含有许多化合物，包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、**酸及脂类等。减血清培养基在减少实验误差方面表现出色。F12培养基产品介绍

    C）大肠埃希菌＋＋－－产气肠杆菌－－＋＋志贺菌属－＋－－沙门菌属－＋－＋表硫化氢和尿素酶试验对肠杆菌属的鉴别试验伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌变形杆菌志贺菌属大肠埃希菌克雷伯菌属硫化氢试验－/＋＋＋＋＋＋＋－－－尿素酶试验－－＋－－＋乳糖发酵试验－－－－＋＋在培养基中加入指示剂或某种化学物质**不需要的**生长，利于需要的**分离，这种培养基称为选择性培养基。常用的抑菌剂有胆盐、煌绿、玫瑰红钠、亚硒酸钠等。常用的指示荆有溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等。美蓝是氧化还原指示剂。例如，在培养基内加入青霉素可**革兰阳性**，而利于革兰阴性**的生长；如果加入链霉素，则可获得与加青霉素相反的选择效果；加入制霉素可*****，有利于**的分离。又如亚**铋琼脂，既能**革兰阳性**生长，又能**许多革兰阴性**生长，但伤寒沙门菌却能在这个培养基上生长出具有棕色环的菌落。SS琼脂是临床**检验中一种常用的选择性培养基。大肠埃希菌在SS培养基上，因发酵乳糖而产酸，使指示剂中性红变深，并使胆盐沉淀，所以菌落红色而不透明。沙门菌分解含硫氨基酸而产生硫化氢，硫化氢与枸橼酸铁形成硫化铁，所以菌落中心呈黑色。痢疾志贺菌，既不发酵乳糖也不产生硫化氧。F12培养基产品介绍F12培养基能够支持细胞的持续分裂。

    微量元素在细胞内通常以与有机物结合的形式存在。其中铁在细胞中参与氧的转运；钴是维生素B12的组成部分，参与叶酸的合成和脂肪酸的合成；镍能够***脱氧核糖核酸酶、乙酰辅酶A合成酶等在细胞内具有重要功能的酶，还具有稳定核酸结构的功能；亚硒酸钠中的硒，作为谷胱甘肽过氧化物酶的辅基，具有抗过氧化物能力，参与消除细胞内的脂肪酸过氧化物，提高细胞的生长速率和活性。在低血清、无血清细胞培养基中，为满足细胞生长增殖需要，常常添加一些成份：蛋白质、多肽、核苷、嘌呤、柠檬酸循环的中间产物、脂类、及一些血清替代因子等。其中蛋白质具有重要的作用，动物细胞对许多物质（难溶于水的离子或脂类物质）的摄取需要借助蛋白质的传递作用，如白蛋白、传递蛋白、贴壁蛋白等能够携带脂肪酸、***、矿物质等促进细胞生长。转铁蛋白是一种重要的传递蛋白，能够结合铁，促进细胞对铁离子的吸收，并具有***作用，其促生长作用可能与其具有生长因子的功能有关。胰岛素可促进细胞对葡萄糖和氨基酸的利用，商业化中一些生长因子以重组蛋白形式添加到培养基中，主要用来刺激细胞增殖，并可促进糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一种重要的刺激细胞生长的化合物，是脑磷酸的合成前提。

    第三节培养基的高压**及效果验证消毒**在医学实践上有着重要意义。它可切断传播途径、控制***扩散造成的危害；也可杀灭物品或器皿上的**，防止医院***；在医学微生物检验的领域中，消毒**是保正***的病原学检验不受外来微生物污染的前提。（一）术语消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐（antisepsis）和无菌(asepsis)是常用术语。下面就术语概念加以叙述。(1)**。是用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。本法适用于制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的**。（如外科器械、注射器、基础培养基**等。）(2)消毒。是破坏物体上活的病原微生物的方法，但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡体温计、新洁尔灭液擦拭检查台等。用于消毒的化学物品称消毒剂(dis-infectant)。一般而言，消毒对象是指物体而不是机体。(3)防腐。直接使用防腐剂(antiseptics)破坏或**活的病原微牛物的方法。如外科手术前碘液擦洗皮肤、双氧水清创伤口或**肥皂清冼双手等。(4)无菌。防止***病原体进入****或物品的操作技术称无菌操作。无菌即为不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有热力、电离辐射、超声波、过滤等。MEM培养基含有多种必需的营养成分和矿物质。

    才能满足新细胞合成、细胞代谢等生化反应所需要的物质和能量。细胞培养基的主要成份是水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助营养物质等。此外，还可能含有血清、血清替代成分、pH指示剂等。水是细胞的主要成份，也是细胞赖以生存的主要环境。细胞培养液中90%以上的成份是水。细胞对水的品质非常敏感，水的品质将直接影响细胞培养的效果。而水中通常含有重金属、氯、磷、有机物、热原等污染物，细胞培养用水须经过纯化，品质应符合***典注射用水标准或者超纯水的标准。能源和碳源是用于维持细胞生命和支持细胞生长，主要包括糖、糖酵解的产物和谷氨酰胺，其他氨基酸是次要的能源和碳源物质。细胞能够利用的糖类主要是六碳糖，目前大多体外培养时选取葡萄糖作为细胞的主要碳源和能量来源，因此细胞培养基中基本都含有葡萄糖，含量一般为5～25mmol/L。在葡萄糖浓度较高时，细胞主要通过扩散作用吸收葡萄糖，细胞膜内外的葡萄糖浓度梯度是细胞吸收葡萄糖的动力；在葡萄糖浓度较低时，主要由钠离子推动的高亲和性转运过程使细胞摄取葡萄糖。葡萄糖进入细胞后参与糖酵解、核酸代谢、糖原合成、能量代谢以及一些氨基酸的合成。与体内的能量供应途径不同。无酚红培养基在细胞实验中减少了不必要的干扰。F12培养基产品介绍

无血清培养基适合于需要无血清环境的细胞系。F12培养基产品介绍

    从而提高菌株增殖速率，但是浓度过大会导致抑菌现象，后期菌株增殖放缓，以产酸为主，2-羟基乙胺还能够作为阳离子表面活性剂，使得细胞壁疏松，提高细胞通透性，促进谷氨酸释放到发酵液，从而提高了谷氨酸产量和糖酸转化率。三、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l、2-羟基乙胺的添加量40mg/l，在此基础上，研究发酵培养基b对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。对照组1采用发酵培养基a进行发酵，不采用发酵培养基b，100l发酵罐中含有70l发酵培养基a；发酵工艺参照实施例1。对照组2：发酵培养基b中不添加琥珀酸，其余同实施例1。对照组3：发酵培养基b中不添加壳聚糖，其余同实施例1。对照组4：发酵培养基a中添加5g/l的琥珀酸，其余同对照组1。实验组为实施例1。具体结果见表1。表1组别菌浓度od600nm谷氨酸产量g/l糖酸转化率％对照组：对照组1采用单一发酵培养基发酵，谷氨酸产量和糖酸转化率明显低于实验组，各组别菌体浓度差异并不大；对照组4在对照组1的基础上添加了琥珀酸，对菌体浓度并没有影响，谷氨酸产量和糖酸转化率也没有明显差异，可能原因是，发酵前期以菌体增殖为主，产酸较少，琥珀酸对菌体增殖并没有明显的刺激作用。F12培养基产品介绍